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À propos de la détection des acides nucléiques, que savez-vous ?
Depuis l’apparition de la COVID-19, les tests d’acide nucléique sont devenus un terme très courant. Un test d’acide nucléique positif est un critère important pour diagnostiquer le COVID-19. WST-8 est devenu l'API pour les kits de test d'acide nucléique. Que savez-vous des tests d’acide nucléique ? Quel est le principe de la détection des acides nucléiques ? Pourquoi les tests d’acide nucléique donnent-ils des faux négatifs ? En plus des tests d’acide nucléique, quelles autres technologies peuvent détecter le nouveau coronavirus ?
Démystifier le principe de détection des acides nucléiques du nouveau coronavirus
Le test d’acide nucléique consiste en fait à détecter s’il y a de l’acide nucléique (ARN) du nouveau coronavirus dans le corps du sujet testé. L'acide nucléique de chaque virus contient des ribonucléotides, et le nombre et l'ordre des ribonucléotides contenus dans différents virus sont différents, ce qui rend chaque virus spécifique.
L'acide nucléique du nouveau coronavirus est également unique, et la détection de l'acide nucléique est la détection spécifique de l'acide nucléique du nouveau coronavirus. Avant le test d'acide nucléique, il est nécessaire de prélever des échantillons d'expectorations du sujet, d'un prélèvement de gorge, de liquide de lavage broncho-alvéolaire, de sang, etc., et en testant ces échantillons, on peut constater que les voies respiratoires du sujet sont infectées par des bactéries. La détection des nouveaux acides nucléiques du coronavirus est couramment utilisée pour la détection d’échantillons par écouvillonnage de gorge. L’échantillon est divisé et purifié, l’éventuel acide nucléique du nouveau coronavirus en est extrait et les préparatifs pour le test sont prêts.
La détection des acides nucléiques des nouveaux coronavirus utilise principalement la technologie RT-PCR quantitative par fluorescence, qui est une combinaison de la technologie PCR quantitative par fluorescence et de la technologie RT-PCR. Dans le processus de détection, la technologie RT-PCR est utilisée pour transcrire de manière inverse l’acide nucléique (ARN) du nouveau coronavirus en acide désoxyribonucléique (ADN) correspondant ; Ensuite, la technologie PCR quantitative par fluorescence est utilisée pour répliquer l’ADN obtenu en grande quantité. L'ADN répliqué est détecté et marqué avec une sonde sexuelle. S’il existe un nouvel acide nucléique du coronavirus, l’instrument peut détecter le signal fluorescent et, à mesure que l’ADN continue de se répliquer, le signal fluorescent continue d’augmenter, détectant ainsi indirectement la présence du nouveau coronavirus.
Pourquoi des faux négatifs se produisent-ils ?
Un faux négatif signifie que la personne testée a été infectée par le nouveau coronavirus, mais que l'acide nucléique du virus n'a pas été détecté, c'est-à-dire que le test d'acide nucléique est négatif. Si un sujet ne présente aucun symptôme pertinent et que le test d'acide nucléique est négatif, il est facile de le laisser relâcher sa vigilance, ce qui peut conduire à une propagation plus large du virus, qui est aussi la ruse du nouveau coronavirus.
Il existe trois raisons principales aux faux négatifs :
Premièrement, la teneur en acide nucléique du nouveau coronavirus dans l’échantillon de test original est trop faible, en dessous de la limite inférieure de détection. Ceci est lié au type d’échantillon collecté et au moment du prélèvement.
Deuxièmement, si le site où l’acide nucléique du nouveau coronavirus se lie à la sonde mute, cela peut affecter l’efficacité de liaison de la sonde lors de la détection, entraînant un signal fluorescent indétectable.
Troisièmement, les faux négatifs sont également liés à la sensibilité de la technologie de détection. Au début de l’épidémie, les kits cliniques n’étaient pas suffisamment matures et leur sensibilité n’était pas suffisamment élevée, et des faux négatifs ont été fréquemment signalés. Plus tard, avec l'amélioration du niveau technique, le taux de précision de la détection a augmenté rapidement et le taux de faux négatifs a continué de diminuer.
Un test d'acide nucléique positif est-il un diagnostic ?
Un résultat positif au test d'acide nucléique peut confirmer la présence d'acide nucléique viral dans les voies respiratoires supérieures du sujet, mais il ne peut pas être directement diagnostiqué comme un patient atteint d'une nouvelle pneumonie coronarienne. Dans le cas d'un test d'acide nucléique positif, le sujet doit faire l'objet d'un diagnostic plus approfondi sur la base de ses antécédents épidémiologiques. Les antécédents de contacts, etc., peuvent être diagnostiqués comme un cas confirmé.
Si le sujet ne présente aucun symptôme pertinent, il est généralement diagnostiqué comme une infection asymptomatique. Les infections asymptomatiques sont également contagieuses, et certaines infections asymptomatiques ont ensuite commencé à montrer des symptômes et sont devenues des patients confirmés.
Autres technologies pour détecter le nouveau coronavirus
Pour les sujets, l’isolement du virus à partir de l’échantillon constitue la base de diagnostic la plus fiable. Cependant, l’isolement du virus est une opération relativement dangereuse, qui doit être réalisée dans un laboratoire offrant un niveau de protection élevé, et qui est longue et coûteuse. . Les institutions de médecine générale n'ont pas cette condition. La plupart d'entre eux utiliseront la méthode de détection de la présence d'anticorps anti-virus dans le sang pour déterminer si le sujet est infecté par le virus. L'hépatite B, le SIDA, etc. sont tous testés de cette manière.
Le nouveau coronavirus peut également être détecté par cette méthode de détection immunologique. Face à l’invasion du nouveau coronavirus, le corps humain va « résister » et produire des anticorps spécifiques IgM et IgG (immunoglobuline M et immunoglobuline G). Si ces deux anticorps spécifiques sont détectés dans le sang du sujet testé, cela peut indiquer que le sujet testé est infecté par le nouveau coronavirus.
Comment détecter les anticorps ? La méthode couramment utilisée est le dosage immunologique par chimiluminescence, c'est-à-dire l'utilisation de réactifs de chimiluminescence ou d'enzymes spécifiques pour marquer des anticorps ou des antigènes, la formation de complexes par réaction immunitaire, puis l'ajout de réactifs de luminescence après lavage. Anticorps spécifiques à l'espèce, l'instrument de chimiluminescence peut détecter le signal luminescent. Cet immunoessai par chimiluminescence est actuellement l’une des techniques d’immunoessai les plus avancées. Il présente une sensibilité élevée, une spécificité forte, une large plage de détection et des résultats rapides, mais le coût de détection est élevé.
De plus, comme il faut un certain temps au corps humain pour produire des anticorps après avoir été infecté par le virus, celui-ci ne peut être détecté qu'après la production des anticorps, ce qui conduit également à une faible rapidité de détection des anticorps. Il faut 2 à 3 semaines après une infection telle que l'hépatite B et le SIDA pour produire des anticorps. Il faut plus de 3 jours pour détecter les anticorps IgM et plus d’une semaine pour détecter les anticorps IgG après une nouvelle infection à coronavirus.
Par conséquent, afin d'attraper la queue du nouveau coronavirus le plus rapidement possible, davantage de détection d'acide nucléique est utilisée, ce qui permet de détecter plus tôt les traces du nouveau coronavirus.
